يزدان كيواني
مطالعه حاضر با هدف بررسی قابلیت زنده ماندن فرزندان حاصل از آمیزشهای متقابل بین ماهی آزاد دریای خزر (Salmo caspius) و قزلآلای رنگینکمان(Oncorhynchusmykiss) و تأثیر القای تریپلوییدی بر آمیختهگری و رشد جنینیانجام شد. این آزمایش شامل شش گروه: قزلآلای رنگینکمان (R)، ماهی آزاد دریای خزر (C)، آمیختههای دیپلویید و تریپلویید بین قزلآلای رنگینکمان مادهو ماهی آزاد دریای خزر نر (3nRCو 2nRC)، آمیختههای دیپلویید و تریپلویید بین ماهی آزاد دریای خزر مادهو قزلآلای رنگینکمان نر (3nCR و 2nCR)بود.القای تریپلوییدی توسط شوک حرارتی پس از لقاح انجام شد. درصد تفریخ گروههای R و C بالای 90% ،گروه 2nRC (35%) و گروه 3nRC (45%) بود که نشاندهنده بازده بالایی از تأثیر القای تریپلوییدیبر میزان بقای آمیختهها است، در حالیکه جنینها در گروههای 2nCR و 3nCR به مرحله تفریخ نرسیدند.تعداد کروموزومها در گروههای R، C، 2nRCو 3nRC به ترتیب 60، 80، 70و 102 عدد شمارش شد. زمان قبل از بستهشدن بلاستوپور مهمترین نقطه در مراحل جنینیبود که تلفات زیادی رخ داد. تفریخ در گروههای R و 3nRC سریعتر از C مشاهده شد. بیشترین وزننهایی و سرعت رشد ویژه در گروههای R و 3nRCمشاهدهشد. بیشترین میزان ناهنجاری در گروه 2nRC مشاهده شد، درحالیکهالقای تریپلوییدی با موفقیت، شیوع لاروهای بدشکل را در گروه 3nRC کاهشداد. از آنالیز مولفه اصلی (PCA)، متغیر متعارف (CVA)، فواصلپروکراست و ماهالانوبیس برای تعیین تغییرات مورفومتریک استفاده شد. آنالیز PCA همپوشانیآمیخته با قزلآلای رنگینکمان را نشان داد و آنالیز CVA هر سه گونه رابه صورت سه جمعیت متمایز گروهبندی کرد. بیشترین اختلاف ظاهری در گونههای ذکرشدهمربوط به بالههای پشتی، مخرجی، شکمی، سینهای، سرپوش آبششی، دهان و چشم در دورانلاروی است. روند تکوین غضروف-استخوان با روش رنگآمیزی آلسیان بلو-آلیزارین ردبررسی شد. لاروهای دو روزه (R, C, 3nRC) کاملاً غضروفیبودند. آغاز استخوانی شدن در قسمت جمجمه و تمامی بالهها به ترتیب در گروههای R، 3nRCو C مشاهده شد. همچنین این مطالعه بهصورت مجدد در دانشگاه گوتینگن آلمان به منظور انجام مطالعات بیان ژن انجام شد کهشامل 5 گروه: قزلآلای رنگینکمان (R)، قزلآلای قهوهای (Salmo trutta)(B)، آمیخته دیپلویید و تریپلویید(القای شوک به دو روش مختلف) بین ماهی قزلآلای رنگینکمان ماده و قزلآلای قهوهاینر (2nRB, 3nRB1, 3nRB2) بود. در 3nRB1 شوک حرارتی ? C28، به مدت 10 دقیقه، 10 دقیقه پس از لقاح و 3nRB2 ازشوک حرارتی ?C 26، به مدت 20 دقیقه، 25 دقیقه پس از لقاح استفاده شد. بیان چهار ژن مرتبط بارشد و ایمنی شامل (GH، IGF-I، IGF-II وTLR3) و دو ژن خانهدار (-actin? و Elongation factor1?) در چهار زمان تکاملی مختلف (تخمچشمزده، یک روز قبل از تفریخ، لارو یک روزه و لارو 21 روزه) مورد بررسی قرارگرفته شد. هر چهار ژن هدف (GH، IGF-I، IGF-II وTLR3) در همه مراحل نمونه برداریشده (از مرحله چشمزدگی تخم تا لارو 21 روزه) بیان شدند. بیان ژن GH و IGF-I در گروه B (قزلآلای قهوهای)در تمام زمانهای نمونهبرداری به طور معنیداری بیشتر از سایر گروهها بود.همچنین بین گروههای 3nRB1 و 3nRB2 با گروه R اختلاف معنیداریمشاهده نشد. بیشترین میزان بیان ژن IGF-I در تمامی گروهها در لاروهای 21روزه و IGF-II در زمان جنینی مشاهده شد. بیشترینمیزان بیان ژن TLR3 در آمیختهها (گروههای 2nRB،3nRB1 و 3nRB2) و کمترین آندر قزلآلای قهوهای (B) اندازهگیری شد.

